IL-17RE Double Nickase Plasmid (h): sc-405190-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-17RE Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-17RE Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-17RE Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL17RE abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-17RE Double Nickase Plasmid (h) | sc-405190-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-17RE Double Nickase Plasmid (h2) | sc-405190-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL17RE kodiert IL‑17RE, eine Typ‑I‑transmembrane Rezeptoruntereinheit, die IL‑17C bindet und mit IL‑17RA kooperiert, um die Signalübertragung der IL‑17‑Familie zu initiieren. Die Ligandenbindung fördert die Rekrutierung des Adaptors ACT1 (TRAF3IP2) sowie nachgeschaltete, TRAF‑abhängige Signalkaskaden, die die Transkriptionsprogramme von NF‑κB, MAPK und C/EBP aktivieren und so die Expression entzündungsassoziierter Gene in Epithel- und Schleimhautgeweben antreiben. IL‑17RE ist für die Biologie von Barrieregeweben hochrelevant, da es antimikrobielle Antworten und die Chemokinproduktion mitprägt, die die Rekrutierung von Neutrophilen und myeloiden Zellen steuert. Eine fehlregulierte IL‑17C/IL‑17RE‑Signalgebung wird mit chronisch‑entzündlichen Erkrankungen in Verbindung gebracht, darunter entzündliche Darmerkrankungen und psoriasisähnliche Hautentzündungen, und wird zudem im Kontext tumorassoziierter Entzündung bei epithelialen Krebserkrankungen untersucht.
IL-17RE Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL17RE-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL17RE abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL17RE-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL17RE-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.