IL-17RA Double Nickase Plasmid (h): sc-401447-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-17RA Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-17RA Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-17RA Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL17RA abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-17RA Double Nickase Plasmid (h) | sc-401447-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-17RA Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401447-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL17RA kodiert den Interleukin-17-Rezeptor A (IL-17RA), eine breit exprimierte Rezeptoruntereinheit, die Signalkomplexe für Zytokine der IL-17-Familie bildet, insbesondere für IL-17A und IL-17F. Die Ligandenbindung aktiviert adaptorvermittelte Signalkaskaden unter Beteiligung von ACT1, TRAF-Proteinen sowie nachgeschalteten NF-κB- und MAPK-Signalwegen und fördert so die Transkription von Chemokinen, Zytokinen und antimikrobiellen Effektoren, die die Rekrutierung von Neutrophilen und Epithelbarriereantworten koordinieren. Eine IL-17RA-abhängige Signalübertragung trägt zur Verstärkung inflammatorischer Kreisläufe an mukosalen Oberflächen sowie in stromalen und myeloiden Kompartimenten bei. Eine fehlregulierte IL-17RA-Aktivität wurde mit der Pathobiologie chronischer Entzündungen und Autoimmunerkrankungen in Verbindung gebracht, darunter psoriasisähnliche Entzündungen, mit chronisch-entzündlichen Darmerkrankungen assoziierte Signalwege und Atemwegsentzündungen, ebenso wie tumorassoziierte Entzündungen im Mikromilieu.
IL-17RA Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL17RA-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL17RA abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL17RA-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL17RA-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.