IL-15Rα Lentiviral Activation Particles (m2): sc-421090-LAC-2

Das murine Gen Il15ra kodiert die Interleukin‑15‑Rezeptor‑Alpha‑Kette (IL‑15Rα), eine hochaffine Bindungsuntereinheit, die IL‑15 einfängt und die Transpräsentation an IL‑2/15Rβ–γc‑Komplexe auf reagierenden Lymphozyten ermöglicht, wodurch die JAK1/JAK3–STAT5‑Signalübertragung verstärkt wird. Über diesen Mechanismus reguliert IL‑15Rα die Entwicklung, das Überleben und die Aktivierung von NK‑Zellen und CD8+‑Gedächtnis‑T‑Zellen und prägt die zytokingetriebene immunologische Homöostase während entzündlicher Prozesse. Eine fehlregulierte Aktivität der IL‑15/IL‑15Rα‑Achse wird mit autoimmunen und entzündlichen Pathologien sowie mit Tumor‑Immun‑Interaktionen in Verbindung gebracht, insbesondere über eine veränderte Funktion zytotoxischer Lymphozyten. Il15ra‑editierte Mausmodelle und daraus abgeleitete Immunzellen werden eingesetzt, um den Transport von Zytokinrezeptoren und die Transpräsentation zu untersuchen, nachgeschaltete Transkriptionsprogramme zu kartieren und die Immunregulation in Infektionen, Autoimmunität und krebsrelevanten Mikroumgebungen zu bewerten.

IL-15Rα Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Il15ra-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IL-15Rα Lentivirale Aktivierungspartikel (m2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Il15ra-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IL-15Rα-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Il15ra-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.