Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-15Rα Double Nickase Plasmid (h): sc-416909-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das IL-15Rα Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- IL-15Rα Double-Nickase-Plasmid (h) und IL-15Rα Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf IL15RA abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-15Rα: sc-374023
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-15Rα Double Nickase Plasmid (h) | sc-416909-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-15Rα Double Nickase Plasmid (h2) | sc-416909-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Humanes IL15RA kodiert die Alpha-Kette des Interleukin‑15‑Rezeptors (IL‑15Rα), eine hochaffine Bindungskomponente, die IL‑15 einfängt und es in trans an Zellen präsentiert, die die IL‑2/IL‑15Rβ‑Kette und die gemeinsame γ‑Kette exprimieren. Dieser Rezeptorkomplex aktiviert eine JAK1/JAK3‑abhängige Signalübertragung mit nachgeschalteter Aktivierung von STAT5 sowie Beteiligung der PI3K‑AKT‑ und MAPK‑Signalwege und prägt dadurch Überleben, Proliferation und Effektor-Differenzierung von Lymphozyten. IL‑15Rα ist zentral für die Homöostase natürlicher Killerzellen und von Gedächtnis‑CD8+‑T‑Zellen und beeinflusst die Dynamik von Zytokinnetzwerken in entzündeten Geweben. Eine dysregulierte IL15RA‑Expression oder Signalgebung wurde mit immunvermittelter Pathologie und veränderter Immunüberwachung in entzündlichen und onkologischen Kontexten in Verbindung gebracht und macht IL15RA zu einem relevanten Ziel für mechanistische Studien zur zytokingetriebenen Immunität.
IL-15Rα Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des IL15RA-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von IL15RA abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die IL15RA-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit IL15RA-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.