Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-15Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421090
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- IL-15Rα Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im IL-15Rα-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: IL-15Rα: sc-374023
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
IL-15Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) | sc-421090 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
Il15ra kodiert den murinen Interleukin‑15‑Rezeptor alpha (IL‑15Rα), eine hochaffine Bindungskomponente, die IL‑15 in trans an IL‑2/15Rβ und die gemeinsame γ‑Kette auf benachbarten Lymphozyten präsentiert. Dieser Rezeptorkomplex koppelt die Zytokinerkennung an die JAK/STAT‑Signalübertragung und unterstützt nachgeschaltete Programme, die Proliferation, Überleben und Differenzierung von NK‑Zellen und CD8+‑T‑Zellen mit Gedächtnisphänotyp regulieren. IL‑15Rα trägt außerdem zur Immunhomöostase bei, indem er Entzündungsreaktionen und das Trafficking von Leukozyten mitprägt – mit Relevanz für Modelle von Autoimmunität, chronischer Entzündung, Infektionen und Tumorimmunologie. Eine genetische Störung von Il15ra ist daher nützlich, um zytokinabhängige Crosstalk‑Mechanismen zwischen antigenpräsentierenden Zellen und reagierenden Lymphozytensubtypen zu untersuchen.
Das IL-15Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Il15ra-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Il15ra-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Il15ra nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IL-15Rα-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Il15ra-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IL-15Rα-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf Il15ra-Exone abzielen, die für die IL-15Rα-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere Il15ra-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom IL-15Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IL-15Rα CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Il15ra-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IL-15Rα HDR-Plasmid (m) und IL-15Rα HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Il15ra-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Il15ra-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.