IL-13Rα2 Lentiviral Activation Particles (h2): sc-402525-LAC-2

Das humane IL13RA2-Gen kodiert den Interleukin-13-Rezeptor alpha 2 (IL-13Rα2), einen hochaffinen IL-13-bindenden Rezeptor, der die Signalübertragung von Typ-2-Zytokinen moduliert und als regulierender „Decoy“-Rezeptor wirken kann, indem er die Verfügbarkeit von IL-13 und nachgeschaltete STAT6-abhängige Transkriptionsprogramme beeinflusst. Die Expression von IL-13Rα2 ist mit Prozessen wie epithelial-mesenchymalen Wechselwirkungen, Remodeling der extrazellulären Matrix und entzündlichen Antworten verknüpft, einschließlich Crosstalk mit Signalwegen, die Zellmigration und Gewebefibrose steuern. Eine dysregulierte IL13RA2-Expression wird häufig mit der Tumorbiologie und Phänotypen des immunologischen Mikroumfelds in Verbindung gebracht und wurde unter anderem bei Krebsarten wie dem Glioblastom sowie in Kontexten fibrotischer Erkrankungen und allergischer Entzündungen untersucht. Gen-Editing von IL13RA2 unterstützt mechanistische Studien zur Dynamik der IL-13-Signalgebung, zu Rezeptor-Ligand-Interaktionen und zu funktionellen Genomik-Screens, die zytokingetriebene Phänotypen in relevanten humanen Zellmodellen bewerten.

IL-13Rα2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IL13RA2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IL-13Rα2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IL13RA2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IL-13Rα2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IL13RA2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.