IGSF4B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405765

Descripción general

CADM3 (también conocido como IGSF4B) codifica una molécula de adhesión celular de la superfamilia de las inmunoglobulinas que sostiene contactos célula–célula independientes del calcio y contribuye a la organización de microdominios de membrana en sitios de uniones intercelulares. Mediante señalización dependiente de la adhesión, CADM3 puede influir en el crecimiento de neuritas, la conectividad sináptica y la arquitectura de los tejidos epiteliales/neurales, vinculándose así con vías que regulan la polaridad celular y el control del crecimiento mediado por contacto. Se han descrito alteraciones en la expresión o regulación de CADM3 en estudios sobre procesos del neurodesarrollo y en biología del cáncer, donde los cambios en los programas de adhesión pueden afectar la invasión, la diferenciación y el comportamiento metastásico. Como factor de adhesión asociado a la superficie, IGSF4B es por tanto relevante para investigar cómo los complejos de unión y la señalización de adhesión remodelan la comunicación celular y la organización tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IGSF4B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CADM3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CADM3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CADM3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IGSF4B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CADM3 para la investigación de la señalización de IGSF4B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de CADM3 críticos para la función de IGSF4B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CADM3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IGSF4B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido IGSF4B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CADM3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IGSF4B (h) y el plásmido HDR IGSF4B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CADM3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CADM3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.