Plasmide Double Nickase (h) IGSF10: sc-415415-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IGSF10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IGSF10 Double Nickase (h) et le plasmide IGSF10 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IGSF10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IGSF10 | sc-415415-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IGSF10 | sc-415415-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGSF10 code une protéine transmembranaire de la superfamille des immunoglobulines, impliquée dans la communication cellule–cellule et dans des processus d’adhésion associés à la matrice extracellulaire, qui influencent l’organisation tissulaire et la mise en place des patrons du développement. Des études d’expression et de génétique ont associé IGSF10 à la modulation des comportements migratoires et de contextes de signalisation qui recoupent l’adhésion cellulaire, le remodelage du cytosquelette et les programmes de différenciation. En biologie humaine, IGSF10 a été étudié en lien avec la temporalité du neurodéveloppement et la régulation de l’axe reproducteur, notamment via des associations rapportées avec des phénotypes de puberté retardée, et il est également exploré comme facteur dépendant du contexte en biologie tumorale. Ces caractéristiques font d’IGSF10 une cible utile pour disséquer les réseaux régulateurs liés à l’adhésion et les conséquences phénotypiques dans des modèles cellulaires pertinents.
IGSF10 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGSF10 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGSF10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGSF10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGSF10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.