IGFBP2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401076-LAC

IGFBP2 (insulinähnliches Wachstumsfaktor-bindendes Protein 2) ist ein sezernierter Regulator der Bioverfügbarkeit von IGF‑I/IGF‑II, der die durch den IGF1R vermittelte Signalübertragung feinabstimmt und dabei die Aktivität der PI3K‑AKT- und MAPK-Signalwege kontextabhängig beeinflusst. Über die Ligandensequestrierung hinaus kann IGFBP2 mit der extrazellulären Matrix und Zelloberflächenrezeptoren interagieren, um Programme für Adhäsion, Migration und Überleben zu modulieren, und wird dadurch mit Gewebeumbau und zellulärer Plastizität in Verbindung gebracht. Veränderte IGFBP2-Expression wurde in zahlreichen Krankheitskontexten beschrieben, darunter in der Krebsbiologie und bei metabolischer Dysregulation, wo es häufig als Vermittler proliferativer Signalgebung und mikroumgebungsabhängiger Interaktionen untersucht wird. Diese Eigenschaften machen IGFBP2 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Wachstumsfaktor-Signalnetzwerke, invasionsbezogene Phänotypen und Pathway-Crosstalk in humanen Zellmodellen zu analysieren.

IGFBP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IGFBP2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IGFBP2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IGFBP2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IGFBP2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IGFBP2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.