Plasmide Double Nickase (h) IGF2BP3: sc-402603-NIC

IGF2BP3 (IMP3) est une protéine conservée se liant à l’ARN, qui reconnaît les transcrits modifiés par la m6A et régule la localisation, la stabilité et la traduction des ARNm au cours du développement et des transitions d’état cellulaire. Elle module des programmes de régulation génique post‑transcriptionnelle liés à la prolifération, à la migration et aux réponses au stress, en influençant des voies telles que PI3K–AKT et MAPK via la stabilisation d’ARNm associés à la croissance et à la survie. IGF2BP3 est fréquemment réexprimée dans des contextes malins et sert de marqueur d’une biologie tumorale agressive, où elle peut favoriser la transition épithélio‑mésenchymateuse et un recâblage métabolique. Ces propriétés font d’IGF2BP3 une cible courante pour l’étude des régulons d’ARN oncogéniques, des mécanismes des lecteurs de la m6A et du contrôle contextuel de l’expression génique.

IGF2BP3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGF2BP3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGF2BP3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGF2BP3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGF2BP3.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.