IFN-α6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421043

概要

マウスの Ifna6 は、インターフェロンα6（IFN-α6）をコードしており、これは病原体関連シグナルや損傷関連シグナルに応答して、抗ウイルスおよび免疫調節プログラムを開始するI型インターフェロンの一種です。IFN-α6 は IFNAR に結合して JAK–STAT シグナル伝達を活性化し、自然免疫防御、抗原提示、サイトカインネットワークを制御するインターフェロン刺激遺伝子（ISG）を誘導します。この経路は、増殖制御やアポトーシスといった細胞の運命決定にも影響し、RIG-I/MDA5 や TLR 経路などのパターン認識受容体シグナルとも交差します。I型インターフェロンシグナルの制御異常は、ウイルス感染に対する感受性や、慢性炎症性・自己免疫様の表現型に関与するとされており、Ifna6 はインターフェロン駆動性病態の機序研究において重要な標的となります。

IFN-α6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfna6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifna6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifna6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-α6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-α6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifna6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-α6の機能に不可欠なIfna6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifna6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-α6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-α6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifna6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-α6 HDRプラスミド（m）および IFN-α6 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfna6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfna6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。