IFITM1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416878-LAC

IFITM1 (interferon-induziertes Transmembranprotein 1) ist ein interferonstimulierbares Gen, das für ein kleines, membranassoziiertes Protein kodiert, das an der intrinsischen antiviralen Abwehr beteiligt ist. IFITM1 moduliert die Eigenschaften zellulärer Membranen und den endosomalen Transport, um virales Eindringen und die Membranfusion zu begrenzen, und ist dabei in die Signalwege von Typ‑I/II‑Interferonen sowie in breitere angeborene Immunwege wie JAK–STAT‑vermittelte Transkriptionsprogramme eingebunden. Über die Wirt‑Pathogen‑Interaktion hinaus wurde eine veränderte IFITM1-Expression mit Zuständen der Immunaktivierung und entzündlichen Mikroumgebungen in Verbindung gebracht; zudem wurden in verschiedenen Krebsmodellen Zusammenhänge mit Tumorbiologie und metastatischem Verhalten beschrieben. Diese Eigenschaften machen IFITM1 zu einem geeigneten Knotenpunkt, um die Interferonantwort, zellintrinsische Immunität und membranabhängige Regulation der Pathogenaufnahme zu untersuchen.

IFITM1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente IFITM1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IFITM1 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der IFITM1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IFITM1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen IFITM1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.