IFI-35 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406072

Panoramica

IFI35 codifica IFI-35, una proteina stimolata dagli interferoni che partecipa alla segnalazione dell’immunità innata e alla modulazione dell’espressione genica infiammatoria. IFI-35 è collegata alle risposte all’interferone di tipo I ed è stato riportato che interagisca con proteine regolatrici dell’immunità, influenzando le vie a valle dell’attivazione dei recettori di riconoscimento dei pattern, come la segnalazione dei recettori tipo RIG-I e dei TLR. Attraverso queste reti, IFI35 contribuisce ai programmi di difesa antivirale e può influenzare la produzione di citochine, la presentazione dell’antigene e, più in generale, gli stati di attivazione delle cellule immunitarie. Una segnalazione dell’interferone deregolata e un’espressione alterata di IFI35 sono state associate a patologie immunomediate e alle interazioni tra tumore e sistema immunitario, a sostegno della sua rilevanza negli studi su infiammazione, biologia delle infezioni e immunologia dei tumori.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IFI-35 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IFI35 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IFI35 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IFI35 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IFI-35.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IFI35 per lo studio della segnalazione di IFI-35, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IFI35 critici per la funzione di IFI-35
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IFI35 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IFI-35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IFI-35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IFI35. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IFI-35 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IFI-35 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IFI35 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IFI35 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.