IFI-35 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406072

Übersicht

IFI35 kodiert IFI-35, ein durch Interferon induziertes Protein, das an der Signalgebung der angeborenen Immunität und an der Modulation der Expression entzündungsrelevanter Gene beteiligt ist. IFI-35 steht mit Typ-I-Interferonantworten in Verbindung und soll mit immunregulatorischen Proteinen interagieren, wodurch es nachgeschaltete Signalwege nach Aktivierung von Mustererkennungsrezeptoren beeinflusst, etwa RIG-I-ähnliche Rezeptor- und TLR-Signalwege. Über diese Netzwerke trägt IFI35 zu antiviralen Abwehrprogrammen bei und kann die Zytokinausschüttung, die Antigenpräsentation sowie umfassendere Aktivierungszustände von Immunzellen beeinflussen. Eine fehlregulierte Interferonsignalgebung und veränderte IFI35-Expression wurden mit immunvermittelter Pathologie und Tumor-Immun-Interaktionen in Zusammenhang gebracht, was seine Relevanz für Studien zu Entzündung, Infektionsbiologie und Krebsimmunologie unterstreicht.

Das IFI-35 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des IFI35-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des IFI35-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von IFI35 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IFI-35-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von IFI35-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IFI-35-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf IFI35-Exone abzielen, die für die IFI-35-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere IFI35-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IFI-35 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom IFI-35 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des IFI35-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IFI-35 HDR-Plasmid (h) und IFI-35 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von IFI35-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten IFI35-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.