Plásmido CRISPR de Activación (h) IFI-35: sc-406072-ACT

El gen humano **IFI35** codifica **IFI-35**, una proteína inducida por interferón que modula la señalización inmunitaria innata y los programas de defensa antiviral aguas abajo de los interferones de tipo I. IFI-35 se asocia con la regulación de las respuestas transcripcionales inflamatorias, incluidas vías que convergen en la expresión de genes estimulados por interferón (ISG) mediada por **JAK/STAT** y la comunicación cruzada con la señalización de receptores de reconocimiento de patrones. Se ha observado una expresión alterada de **IFI35** en contextos de inflamación crónica, respuestas a infecciones virales y fenotipos inmunitarios asociados a tumores, donde puede influir en redes de citocinas y en las interacciones entre células inmunitarias. En consecuencia, **IFI35** se estudia con frecuencia como un nodo que conecta las respuestas al interferón con cambios en el estado celular, como la adaptación al estrés y el control del crecimiento mediado por el sistema inmunitario.

IFI-35 El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de IFI35 sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

IFI-35 El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus IFI35 en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional IFI35, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de IFI-35. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo IFI35 y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de IFI-35 en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía IFI-35 en células tumorales con expresión de IFI35 silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.