IFI-203 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-421032

Übersicht

Ifi203 kodiert IFI-203, ein in Mäusen vorkommendes, durch Interferon induzierbares Protein, das an der angeborenen Immunüberwachung und der Regulation entzündlicher Genprogramme beteiligt ist. IFI-203 wird häufig im Kontext interferonstimulierter Antworten untersucht, bei denen es die Nukleinsäure-Erkennung, die transkriptionelle Kontrolle und nachgeschaltete Zytokin-Signalwege beeinflussen kann. Eine veränderte Regulation von Interferon-Signalwegen ist für Modelle von Autoimmunität, chronischer Entzündung und Wirt–Pathogen-Interaktionen relevant, wodurch Ifi203 ein nützlicher Lokus ist, um zellintrinsische Schaltkreise des Immunsystems zu analysieren. Loss-of-Function- oder Gain-of-Function-Manipulationen von Ifi203 können helfen zu klären, wie interferongetriebene Programme Aktivierungszustände von Immunzellen und entzündliche Gewebephänotypen in der Maus prägen.

Das IFI-203 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Ifi203-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Ifi203-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Ifi203 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die IFI-203-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Ifi203-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der IFI-203-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Ifi203-Exone abzielen, die für die IFI-203-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Ifi203-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom IFI-203 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom IFI-203 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Ifi203-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das IFI-203 HDR-Plasmid (m) und IFI-203 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Ifi203-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Ifi203-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.