IDH1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-421022-LAC

Das murine Gen **Idh1** kodiert die zytosolische, NADP\+-abhängige Isocitrat-Dehydrogenase **IDH1**, ein zentrales Stoffwechselenzym, das Isocitrat zu **α‑Ketoglutarat** umsetzt und dabei **NADPH** erzeugt. Durch die Regulation der NADPH-Verfügbarkeit unterstützt IDH1 die glutathionbasierte Redox-Homöostase, die Lipidbiosynthese und zelluläre Antworten auf oxidativen Stress und verknüpft so den zentralen Kohlenstoffstoffwechsel mit antioxidativen Schutzmechanismen. Die IDH1-Aktivität beeinflusst zudem die Biologie **α‑ketoglutaratabhängiger Dioxygenasen** und kann über das Metabolitengleichgewicht epigenetische sowie hypoxieassoziierte Signalwege modulieren. Eine Fehlregulation von **Idh1** ist daher relevant für Studien zu metabolischer Umprogrammierung, redoxgetriebenen Phänotypen und Signalweg-Crosstalk, der Proliferation und Differenzierung in murinen Modellsystemen beeinflusst.

IDH1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Idh1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IDH1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Idh1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IDH1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Idh1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.