Plasmide Double Nickase (h) Id2: sc-400550-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Id2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Id2 Double Nickase (h) et le plasmide Id2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ID2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Id2 Antibody (E-7): sc-398104
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Id2 | sc-400550-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Id2 | sc-400550-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’ID2 humain (inhibitor of DNA binding 2) code une protéine à motif hélice–boucle–hélice dépourvue de domaine de liaison à l’ADN, qui agit comme régulateur dominant négatif des protéines E afin de moduler des programmes transcriptionnels contrôlant la prolifération, l’engagement de lignée et la différenciation. ID2 intègre des signaux provenant de voies du développement et de réponses au stress, notamment les réseaux TGF-β/BMP et liés à Notch, influençant le contrôle du cycle cellulaire et les décisions de destinée cellulaire dans des contextes immunitaires, neuronaux et épithéliaux. Une expression et une activité dérégulées d’ID2 ont été associées à des états de différenciation altérés et à des phénotypes de croissance aberrants, ce qui en fait un nœud utile pour étudier les mécanismes de plasticité cellulaire et la biologie tumorale. ID2 est également pertinent pour la recherche sur le développement et la fonction des cellules immunitaires, où il contribue à façonner les circuits transcriptionnels sous-jacents à la spécification lymphoïde et myéloïde.
Id2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ID2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ID2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ID2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ID2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.