Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) I2PP2A: sc-400881-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)I2PP2A consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa I2PP2A (h) y el plásmido de doble nickasa I2PP2A (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a SET. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: I2PP2A Anticuerpo (F-9): sc-133138
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) I2PP2A | sc-400881-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) I2PP2A | sc-400881-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SET codifica I2PP2A (también conocida como SET/TAF-Iβ), una fosfoproteína nuclear multifuncional que inhibe la fosfatasa de proteínas 2A (PP2A) y modula la señalización dependiente de la fosforilación. I2PP2A participa en la organización de la cromatina y el control epigenético mediante interacciones con histonas y factores de ensamblaje de nucleosomas, influyendo en programas de transcripción, la replicación del ADN y las respuestas al daño del ADN. Al restringir la actividad de PP2A, SET afecta las vías MAPK/ERK, AKT y los puntos de control del ciclo celular, modelando los resultados de la proliferación y de la señalización frente al estrés. La expresión o función desregulada de SET se ha asociado con un equilibrio alterado de fosfatasas y estados de cromatina observados en diversos contextos de cáncer y en otros fenotipos proliferativos o asociados a inestabilidad genómica.
I2PP2A El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus SET en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de SET. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de SET. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con SET alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.