Plasmide Double Nickase (h) HSPA2: sc-400832-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HSPA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HSPA2 Double Nickase (h) et le plasmide HSPA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HSPA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HSPA2 | sc-400832-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HSPA2 | sc-400832-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPA2 code pour un chaperon moléculaire cytosolique de la famille HSP70, qui favorise le repliement des protéines dépendant de l’ATP, le repliement de substrats dénaturés par le stress et le contrôle qualité via des interactions avec des co‑chaperons et des composants du système ubiquitine‑protéasome. Dans les cellules humaines, HSPA2 soutient la protéostasie en conditions basales comme en situation de stress, en influençant des voies liées à la réponse au choc thermique, à la progression du cycle cellulaire et au maintien de l’assemblage des complexes protéiques. L’expression de HSPA2 et les perturbations de sa fonction ont été étudiées dans des contextes incluant la biologie des cellules germinales et la protéostasie des cellules tumorales, où une activité de chaperon altérée peut affecter la signalisation de survie et l’adaptation au stress. En tant que régulateur nodal de l’intégrité du protéome, HSPA2 constitue une cible utile pour des études mécanistiques du stress de repliement, du contrôle de l’agrégation et du remodelage des réseaux de chaperons.
HSPA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HSPA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HSPA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HSPA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HSPA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.