HSF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400432-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSF1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSF1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSF1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSF1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSF1 Anticorpo (E-4): sc-17757
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400432-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSF1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400432-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HSF1 humano (fator de choque térmico 1) é um regulador mestre da transcrição da resposta ao choque térmico, que coordena a expressão induzível de chaperonas moleculares como HSP70 e HSP90 para manter a proteostase durante o estresse celular. Diante de estresse proteotóxico, o HSF1 sofre trimerização e se acumula no núcleo, liga-se aos elementos de choque térmico (HSEs) e ativa programas que afetam o dobramento de proteínas, o controle de qualidade e o metabolismo adaptativo ao estresse. A atividade do HSF1 interage com vias que regulam apoptose, autofagia e a resposta a proteínas mal dobradas (unfolded protein response), moldando a resiliência celular a agressões oxidativas, térmicas e metabólicas. A desregulação da sinalização de HSF1 tem sido implicada em distúrbios de proteostase e em fenótipos de adaptação ao estresse observados em diversos modelos de doença, sustentando estudos mecanísticos de redes transcricionais responsivas ao estresse.
HSF1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSF1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSF1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSF1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSF1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.