HS6ST2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407513

Übersicht

HS6ST2 kodiert die Heparansulfat-6-O-Sulfotransferase 2, ein im Golgi lokalisiertes Enzym, das während der Biosynthese von Heparansulfat-Proteoglykanen die 6-O-Sulfatierung von Glucosaminresten katalysiert. Diese Modifikation prägt die Sulfatierungsmuster von Heparansulfat, die die Ligandenbindung und Korezeptor-Funktionen regulieren und dadurch Signalwege wie FGF, VEGF, WNT, BMP sowie chemokinvermittelte Signale beeinflussen. Durch die Feinabstimmung von Interaktionen zwischen extrazellulärer Matrix und zelloberflächenständigen Glykosaminoglykanen trägt HS6ST2 zu Zelladhäsion, Migration und entwicklungsbiologischer Musterbildung bei. Veränderte Heparansulfat-Sulfatierung wurde mit fehlregulierter Wachstumsfaktor-Signalgebung und einem Umbau des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht, was die Untersuchung von HS6ST2 in der Krebsbiologie und anderen Erkrankungen, die mit extrazellulärmatrixabhängiger Signalübertragung zusammenhängen, unterstützt.

Das HS6ST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des HS6ST2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des HS6ST2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von HS6ST2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die HS6ST2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von HS6ST2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der HS6ST2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf HS6ST2-Exone abzielen, die für die HS6ST2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere HS6ST2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom HS6ST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom HS6ST2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des HS6ST2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das HS6ST2 HDR-Plasmid (h) und HS6ST2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von HS6ST2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten HS6ST2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.