HS3ST3B1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-424928

개요

Hs3st3b1은 헤파란 황산-글루코사민 3-O-설포트랜스퍼레이스 3B1(HS3ST3B1)을 암호화하며, 이는 골지체에 국소화된 효소로 헤파란 황산 사슬에 3-O-황산기(3-O-sulfate)를 부가합니다. 이 변형은 헤파란 황산 프로테오글리칸이 성장인자, 케모카인, 세포외기질 구성요소와 결합하는 양상을 조절하여, FGF 및 VEGF 경로의 조절과 세포–세포 간 커뮤니케이션을 포함한 신호전달과 부착(adhesion) 과정에 영향을 줍니다. 헤파란 황산의 황산화 패턴 변화는 형태형성인자(morphogen) 농도구배의 이상, 염증성 신호전달, 종양–기질 상호작용의 교란과 연관되는 것으로 보고되어 왔으며, HS3ST3B1은 미세환경 조절과 수용체–리간드 특이성 연구에서 중요한 표적이 됩니다. 마우스 시스템에서 Hs3st3b1의 교란은 발달 및 조직 항상성에서 글리코사미노글리칸 구조–기능 관계를 기전적으로 규명하는 데 도움을 줍니다.

HS3ST3B1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Hs3st3b1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Hs3st3b1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Hs3st3b1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HS3ST3B1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HS3ST3B1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Hs3st3b1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HS3ST3B1 기능에 중요한 Hs3st3b1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Hs3st3b1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HS3ST3B1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 HS3ST3B1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Hs3st3b1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HS3ST3B1 HDR 플라스미드 (m) 및 HS3ST3B1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Hs3st3b1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Hs3st3b1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.