Plásmido Doble Nickase (m) HRC: sc-420947-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)HRC consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HRC (m) y el plásmido de doble nickasa HRC (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Hrc. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) HRC | sc-420947-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) HRC | sc-420947-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen Hrc de ratón codifica la proteína de unión al calcio rica en histidina (HRC), un componente luminal del retículo sarcoplásmico que modula la dinámica de almacenamiento y liberación de calcio en el músculo estriado. HRC interactúa con elementos clave de la maquinaria de acoplamiento excitación–contracción, incluidos la recaptación de Ca2+ impulsada por SERCA y la liberación de Ca2+ dependiente del receptor de rianodina, moldeando así los transitorios citosólicos de Ca2+ y la señalización posterior. A través de su papel en la homeostasis del calcio, HRC se vincula a vías que regulan la contractilidad de los miocitos, las respuestas al estrés y programas de transcripción dependientes de Ca2+. La desregulación de la función de HRC se ha asociado con alteraciones en la fisiología del músculo cardíaco y esquelético y se estudia con frecuencia en el contexto de la arritmogénesis y de fenotipos celulares relevantes para la cardiomiopatía.
HRC El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hrc en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hrc. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hrc. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hrc alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.