Plásmido Doble Nickase (h) HoxA9: sc-401583-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxA9 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxA9 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxA9 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXA9. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HoxA9 Anticuerpo (HOX5I043): sc-81291
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxA9 | sc-401583-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxA9 | sc-401583-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA9 codifica el factor de transcripción con homeobox HoxA9, un regulador clave del patrón anteroposterior y del compromiso de linaje hematopoyético mediante la unión al ADN específica de secuencia y el control transcripcional de programas génicos del desarrollo. En células humanas, HoxA9 ayuda a coordinar la proliferación y la diferenciación al modular redes que se cruzan con el mantenimiento de células madre, la maduración mieloide y la regulación transcripcional dependiente de la cromatina. La expresión desregulada de HOXA9 se asocia con frecuencia con estados transcripcionales leucemogénicos y una autorrenovación alterada, lo que lo convierte en un nodo ampliamente estudiado en modelos de malignidad hematopoyética. Su actividad también se examina en biología del desarrollo y en estudios epigenéticos para comprender el uso de potenciadores dependiente del contexto y los circuitos de regulación génica.
HoxA9 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXA9 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXA9. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXA9. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXA9 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.