HoxA5 Lentiviral Activation Particles (h): sc-402499-LAC

HOXA5 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HoxA5, einen zentralen Regulator der anterior-posterioren Musterbildung und von Zellschicksalsentscheidungen während der Embryogenese und der Gewebedifferenzierung. HoxA5 bindet an sequenzspezifische DNA-Motive, um Transkriptionsprogramme zu koordinieren, die die epitheliale und mesenchymale Entwicklung prägen, und beeinflusst dabei Prozesse wie Organmorphogenese, Zellmigration und die Organisation der extrazellulären Matrix. In der Erwachsenenbiologie wird eine fehlregulierte HOXA5-Expression mit veränderten Differenzierungszuständen und onkogenen Signalnetzwerken in Verbindung gebracht, einschließlich Signalwegen, die mit Zellzykluskontrolle, Apoptose und Linienspezifizierung verknüpft sind. Diese Eigenschaften machen HOXA5 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung transkriptioneller Schaltkreise, entwicklungsbiologischer Reprogrammierung und krankheitsrelevanter genregulatorischer Netzwerke in menschlichen Zellen.

HoxA5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente HOXA5-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HoxA5 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der HOXA5-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HoxA5-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen HOXA5-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.