HoxA2 Double Nickase Plasmid (h): sc-403732-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das HoxA2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- HoxA2 Double-Nickase-Plasmid (h) und HoxA2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf HOXA2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
HoxA2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-403732-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxA2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403732-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA2 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HoxA2, einen sequenzspezifischen DNA-bindenden Regulator, der während der Embryogenese zur Etablierung der anterior-posterioren Musterbildung und der segmentalen Identität beiträgt, insbesondere bei der Entwicklung der Rhombomeren des Hinterhirns und von Derivaten des zweiten Kiemenbogens. HoxA2 integriert Entwicklungssignale mit Chromatin- und Transkriptionsprogrammen, um die Linienfestlegung, neuronale Differenzierung und morphogenetische Prozesse zu steuern. Eine dysregulierte HOXA2-Expression wurde in mehreren Krebs- und Differenzierungskontexten beschrieben, in denen veränderte Homeobox-Netzwerke Proliferation, Invasion und die Stabilität von Zellschicksalen stören können. Als Entwicklungsregulator wird HOXA2 häufig untersucht, um die Enhancer-Promotor-Logik, transkriptionelle Hierarchien und epigenetische Zustände zu kartieren, die gewebespezifische Genexpression aufrechterhalten.
HoxA2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des HOXA2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von HOXA2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die HOXA2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit HOXA2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.