hnRNP H3 Plasmide Double Nickase (h): sc-404805-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- hnRNP H3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il hnRNP H3 Double Nickase Plasmid (h) e il hnRNP H3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HNRNPH3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: hnRNP H3 Antibody (D-4): sc-376416
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
hnRNP H3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-404805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP H3 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-404805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPH3 codifica per la ribonucleoproteina nucleare eterogenea umana hnRNP H3, una proteina legante l’RNA che riconosce motivi ricchi in guanine (G) e contribuisce a coordinare le decisioni di splicing del pre‑mRNA. hnRNP H3 partecipa alla regolazione, associata allo spliceosoma, dell’uso alternativo degli esoni, accoppiando l’elaborazione dell’RNA con la trascrizione e la maturazione dell’mRNA. Attraverso queste funzioni contribuisce al controllo dell’equilibrio tra le isoforme trascrittomiche, che influenza vie quali la regolazione del ciclo cellulare, le risposte allo stress e il metabolismo dell’RNA. L’attività deregolata della famiglia hnRNP e le perturbazioni delle reti di splicing sono spesso studiate nel contesto della trasformazione oncogena e dei meccanismi delle malattie neurodegenerative, rendendo HNRNPH3 un bersaglio utile per analizzare fenotipi dipendenti dallo splicing.
hnRNP H3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HNRNPH3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HNRNPH3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HNRNPH3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HNRNPH3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.