Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP H3: sc-404805-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)hnRNP H3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa hnRNP H3 (h) y el plásmido de doble nickasa hnRNP H3 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HNRNPH3. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: hnRNP H3 Anticuerpo (D-4): sc-376416
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP H3 | sc-404805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) hnRNP H3 | sc-404805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPH3 codifica la ribonucleoproteína nuclear heterogénea humana hnRNP H3, una proteína de unión a ARN que reconoce motivos ricos en guanina y ayuda a coordinar las decisiones de empalme (splicing) del pre-ARNm. hnRNP H3 participa en la regulación del uso alternativo de exones asociada al espliceosoma, acoplando el procesamiento de ARN con la transcripción y la maduración del ARNm. A través de estas funciones contribuye al control del equilibrio de isoformas de transcritos, lo que moldea vías como la regulación del ciclo celular, las respuestas al estrés y el metabolismo del ARN. La actividad desregulada de la familia hnRNP y las alteraciones de la red de splicing se estudian con frecuencia en el contexto de la transformación oncogénica y de los mecanismos de enfermedades neurodegenerativas, lo que convierte a HNRNPH3 en una diana útil para investigar fenotipos dependientes del splicing.
hnRNP H3 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HNRNPH3 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HNRNPH3. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HNRNPH3. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HNRNPH3 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.