Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) hnRNP H: sc-425559-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) hnRNP H correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide hnRNP H Double Nickase (m) et le plasmide hnRNP H Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Hnrnph1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) hnRNP H | sc-425559-NIC | 20 µg | $410.00 |
Hnrnph1 chez la souris code la ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène H (hnRNP H), une protéine liant l’ARN qui reconnaît des motifs riches en G afin de réguler l’épissage des pré-ARNm, la polyadénylation alternative et, plus largement, des étapes de maturation de l’ARN qui façonnent le répertoire d’isoformes de transcrits. hnRNP H agit au sein des réseaux du spliceosome et de la maturation co‑transcriptionnelle de l’ARN, influençant la stabilité et la traduction des ARNm via son impact sur l’inclusion des exons et la formation de l’extrémité 3′. Une activité altérée de hnRNP H peut déplacer l’équilibre des isoformes dans des programmes neuronaux et prolifératifs, faisant de Hnrnph1 un locus utile pour étudier les mécanismes reliant le traitement de l’ARN à la régulation de l’état cellulaire et au remodelage du transcriptome associé aux maladies. Les travaux sur Hnrnph1 soutiennent également l’étude de la manière dont des perturbations de facteurs d’épissage se propagent à travers les circuits de régulation génique et le métabolisme de l’ARN en réponse au stress.
hnRNP H Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hnrnph1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hnrnph1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hnrnph1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hnrnph1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.