HMG-3/HMGB3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420875

Descripción general

Hmgb3 codifica la proteína de caja de grupo de alta movilidad HMGB3 (HMG-3), un factor asociado a la cromatina no histónico que se une al ADN y lo curva para modular la arquitectura del nucleosoma y la accesibilidad del genoma. HMGB3 participa en la regulación de programas transcripcionales, la replicación y reparación del ADN, y la dinámica de la cromatina de orden superior, influyendo así en la progresión del ciclo celular y la diferenciación específica de linaje. A través de sus funciones en el remodelado de la cromatina y en procesos sensibles al daño del ADN, la actividad alterada de HMGB3 se ha vinculado con una proliferación desregulada y con redes aberrantes de expresión génica hematopoyéticas y del desarrollo. En sistemas murinos, Hmgb3 se estudia con frecuencia para desentrañar el control epigenético de los estados de células madre/progenitoras y las consecuencias moleculares de la perturbación de la cromatina.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HMG-3/HMGB3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hmgb3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hmgb3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hmgb3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HMG-3/HMGB3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hmgb3 para la investigación de la señalización de HMG-3/HMGB3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Hmgb3 críticos para la función de HMG-3/HMGB3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hmgb3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HMG-3/HMGB3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido HMG-3/HMGB3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hmgb3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HMG-3/HMGB3 (m) y el plásmido HDR HMG-3/HMGB3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hmgb3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hmgb3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.