HMG-20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407302

概要

HMG20A は HMG-20A をコードしており、HMG（高移動度群）様のクロマチン結合因子として、ヌクレオソームの配置や制御複合体の DNA へのアクセス性に影響を与えることで転写調節に寄与します。HMG-20A はクロマチンリモデリング因子やヒストン修飾酵素群と相互作用し、神経発生関連遺伝子の発現を含む系譜（リネージ）プログラムのエピジェネティック制御に関与することが示唆されています。プロモーターおよびエンハンサー活性を形成することで、細胞周期制御、分化、ならびに細胞アイデンティティの維持に影響し得ます。HMG20A に関連するクロマチン状態の調節異常は、神経学的表現型やがんに伴う転写制御の破綻を研究する上で重要です。

HMG-20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるHMG20A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、HMG20A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、HMG20Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、HMG-20Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、HMG-20Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、HMG20A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• HMG-20Aの機能に不可欠なHMG20Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、HMG20Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• HMG-20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびHMG-20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、HMG20A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  HMG-20A HDRプラスミド（h）および HMG-20A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはHMG20Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のHMG20A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。