Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Lentiviral Activation Particles (m): sc-420820-LAC

Hdac6 kodiert die Histon-Deacetylase 6 (HDAC6), eine überwiegend zytoplasmatische Deacetylase, die die Acetylierung nicht-histonischer Substrate wie α‑Tubulin, HSP90 und Cortactin reguliert und dadurch die Mikrotubuli-Dynamik, die Chaperon-Aktivität und den Aktin-Umbau beeinflusst. Über diese Funktionen koordiniert HDAC6 zentrale Prozesse wie Autophagie und die aggresomvermittelte Beseitigung fehlgefalteter Proteine, den intrazellulären Transport sowie Stressantwort-Signalwege. Die HDAC6-Aktivität überschneidet sich mit Proteostase-Pfaden, die eine ubiquitinabhängige Qualitätskontrolle umfassen, und kann entzündliche Signalgebung sowie Programme der Zellmotilität modulieren. Fehlregulierte, mit HDAC6 assoziierte Netzwerke wurden mit Modellen der Neurodegeneration, krebsassoziierten Phänotypen und immunvermittelter Pathologie in Verbindung gebracht, was ihren breiten Nutzen für mechanistische Studien unterstreicht.

Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Hdac6-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Histone Deacetylase 6 (HDAC6) Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Hdac6-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Histone Deacetylase 6 (HDAC6)-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Hdac6-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.