Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Lentiviral Activation Particles (m): sc-436647-LAC

Das murine Hdac1-Gen kodiert Histon-Deacetylase 1 (HDAC1), eine HDAC der Klasse I, die Acetylgruppen von Lysinresten an Histonen und anderen nukleären Substraten entfernt, um die Chromatinzugänglichkeit und Transkriptionsprogramme zu regulieren. HDAC1 wirkt in multiproteinären Korepressor-Komplexen wie SIN3, NuRD und CoREST und ist damit mit der Kontrolle des Zellzyklus, DNA-Schadensantworten und der linienspezifischen Differenzierung verknüpft. Durch die Kopplung an Transkriptionsfaktoren und Chromatin-Remodeller prägt HDAC1 epigenetische Zustände, die Proliferation, Apoptose und die entwicklungsabhängige Genexpression beeinflussen. Eine fehlregulierte HDAC1-Aktivität wird häufig im Kontext onkogener transkriptioneller Repression, neuroentwicklungsbezogener Phänotypen und Aktivierungszustände von Immunzellen untersucht und stellt damit einen zentralen Knotenpunkt für epigenetikgetriebene Krankheitsmechanismen in Mausmodellen dar.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Hdac1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Hdac1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Histone Deacetylase 1 (HDAC1)-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Hdac1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.