Plasmide Double Nickase (h) Histone cluster 1 H1E: sc-402775-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Histone cluster 1 H1E correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Histone cluster 1 H1E Double Nickase (h) et le plasmide Histone cluster 1 H1E Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HIST1H1E. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Histone cluster 1 H1E | sc-402775-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Histone cluster 1 H1E | sc-402775-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H1E code l’histone du cluster 1 H1E, une variante de l’histone de liaison H1 qui se fixe à l’ADN nucléosomal et stabilise la structure de la chromatine d’ordre supérieur. En modulant l’espacement des nucléosomes et la compaction de la chromatine, H1E influence l’accessibilité du génome à la transcription, à la réplication et à la réparation de l’ADN, contribuant ainsi à la régulation épigénétique et à une dynamique de la chromatine couplée au cycle cellulaire. Des altérations de la composition ou du dosage des histones H1 peuvent perturber les programmes globaux d’expression génique et l’intégrité de la chromatine, faisant de HIST1H1E une cible pertinente pour les études portant sur la régulation du développement, la stabilité du génome et le remodelage de la chromatine associé aux maladies. Comme les variantes H1 peuvent influencer des réseaux transcriptionnels spécifiques de lignée, HIST1H1E est fréquemment étudié dans des contextes tels que la différenciation, les réponses au stress et la dérégulation transcriptionnelle.
Histone cluster 1 H1E Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HIST1H1E dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HIST1H1E. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HIST1H1E. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HIST1H1E.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.