Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HiNF-P CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-416760
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- HiNF-P Das CRISPR/Cas9-Knockout (KO)-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, von denen jedes für die Cas9-Nuklease und eine zielspezifische 20-nt-Guide-RNA (gRNA) kodiert, die für maximale Knockout-Effizienz unter Verwendung von Sequenzen aus der GeCKO v2-Bibliothek entwickelt wurde
- gRNA-Sequenzen lenken Cas9 so, dass es ortsspezifische Doppelstrangbrüche (DSBs) im HiNF-P-Genomlokus induziert, was zu einem Gen-Knockout durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ) führt
- Die Puromycin-Resistenz- und RFP-Gene werden von LoxP-Stellen flankiert, was die Entfernung der Selektionsmarker mittels Cre-Rekombinase (Cre-Vektor: sc-418923) nach der Etablierung stabiler Knockout-Zelllinien ermöglicht
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: HiNF-P: sc-373855
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
HiNF-P CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) | sc-416760 | 20 µg | $397.00 |
Übersicht
HINFP kodiert den Transkriptionsfaktor HiNF‑P, einen zellzyklusregulierten Regulator der Histon‑H4‑Genexpression, der dazu beiträgt, den Chromatinaufbau mit der DNA‑Replikation zu koordinieren. HiNF‑P wirkt an Promotoren von S‑Phasen‑Genen und ist in transkriptionelle und epigenetische Kontrollprogramme eingebunden, die während der Proliferation die Genomstabilität aufrechterhalten. Eine Störung der HINFP‑abhängigen Histonversorgung kann die Nukleosomenablagerung, das Replikationstiming und DNA‑Schadensantworten beeinträchtigen und verbindet diesen Signalweg mit dysregulierten Wachstumsphänotypen, wie sie in der Krebsbiologie und anderen proliferationsassoziierten Erkrankungen untersucht werden. Als humaner nukleärer Faktor wird HiNF‑P häufig in Modellen der Zellzykluskontrolle, des Replikationsstresses und der Chromatinorganisation untersucht.
Das HiNF-P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des HINFP-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des HINFP-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.
Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von HINFP nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die HiNF-P-Proteinexpression aufheben.
Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von HINFP-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der HiNF-P-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.
Hauptmerkmale
- sgRNAs, die auf HINFP-Exone abzielen, die für die HiNF-P-Funktion entscheidend sind
Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
Pool von Plasmiden, die auf mehrere HINFP-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion
Designvarianten
CRISPRs +/- HDRs
- gRNAs, die vom HiNF-P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom HiNF-P CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des HINFP-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das HiNF-P HDR-Plasmid (h) und HiNF-P HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von HINFP-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten HINFP-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.