hepcidin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-429976
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- hepcidin El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico hepcidin, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
hepcidin Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-429976 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen **Hamp** del ratón codifica la **hepcidina**, una hormona peptídica producida en el hígado que actúa como regulador central de la homeostasis sistémica del hierro. La hepcidina se une al exportador de hierro **ferroportina (SLC40A1)** y desencadena su internalización y degradación, limitando así la absorción intestinal de hierro y controlando su liberación desde macrófagos y hepatocitos. Su transcripción está regulada por señales inflamatorias como **IL-6/STAT3** y por vías de detección de hierro, entre ellas **BMP/SMAD**, integrando la inmunidad innata con el metabolismo del hierro. La desregulación del eje hepcidina–ferroportina se ha implicado en estados de sobrecarga de hierro y de restricción de hierro, y se estudia ampliamente en modelos de anemia de la inflamación, fenotipos tipo hemocromatosis e inmunidad nutricional asociada a infecciones.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO hepcidin (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hamp en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hamp junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hamp tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína hepcidin.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hamp para la investigación de la señalización de hepcidin, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Hamp críticos para la función de hepcidin
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hamp para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido hepcidin CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido hepcidin CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hamp. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR hepcidin (m) y el plásmido HDR hepcidin (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hamp para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hamp definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.