Plásmido Doble Nickase (h) Heme Oxygenase 1/HMOX1: sc-400157-NIC

HMOX1 codifica la hemo oxigenasa 1 (HO-1), una enzima inducible asociada al retículo endoplásmico que cataliza la degradación del hemo a biliverdina, hierro libre y monóxido de carbono, conectando el recambio del hemo con la homeostasis redox celular. HO-1 es un efector central de la respuesta al estrés oxidativo y se integra con la señalización NRF2/KEAP1, las vías de manejo del hierro y mediadores inflamatorios para modular la citoprotección, la función mitocondrial y las decisiones sobre el destino celular. La regulación alterada de HMOX1 se ha asociado con una señalización desregulada de especies reactivas de oxígeno, una captación/secuestro de hierro deficiente y cambios en las respuestas impulsadas por citocinas. Estos procesos se investigan con frecuencia en contextos como la biología vascular, la neuroinflamación, el estrés metabólico y la remodelación del microambiente tumoral, donde el metabolismo del hemo y el estrés oxidativo son variables clave.

Heme Oxygenase 1/HMOX1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HMOX1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HMOX1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HMOX1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HMOX1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.