Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
HB9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402097
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- HB9 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico HB9, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HB9 Anticuerpo (F-5): sc-515769
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
HB9 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402097 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
MNX1 codifica el factor de transcripción homeobox HB9, un regulador de unión al ADN esencial para el patrón embrionario y la especificación de linajes, en particular en las neuronas motoras en desarrollo de la médula espinal y en progenitores pancreáticos. HB9 controla programas transcripcionales que gobiernan la diferenciación neuronal, la guía axonal y la restricción del destino celular mediante la coordinación de redes downstream de reguladores del desarrollo. La expresión desregulada de MNX1 o una actividad aberrante de HB9 se ha asociado con estados de diferenciación alterados y programas transcripcionales oncogénicos en contextos de tumores hematológicos y sólidos. Como factor de transcripción del desarrollo, MNX1 se estudia con frecuencia para definir circuitos de regulación génica, transiciones en el estado de la cromatina y efectos dependientes del contexto sobre la proliferación y la diferenciación.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO HB9 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MNX1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MNX1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MNX1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HB9.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MNX1 para la investigación de la señalización de HB9, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de MNX1 críticos para la función de HB9
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MNX1 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido HB9 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HB9 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MNX1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HB9 (h) y el plásmido HDR HB9 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MNX1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MNX1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.