Plasmide Double Nickase (m) HAX-1: sc-423888-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) HAX-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HAX-1 Double Nickase (m) et le plasmide HAX-1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Hax1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) HAX-1 | sc-423888-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) HAX-1 | sc-423888-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hax1 chez la souris code HAX-1, une protéine principalement associée aux mitochondries et au réticulum endoplasmique, qui module la survie cellulaire, l’homéostasie du calcium et la dynamique du cytosquelette. HAX-1 participe au contrôle de l’apoptose intrinsèque en influençant l’intégrité de la membrane mitochondriale et la signalisation dépendante des caspases, et elle a été liée à la régulation de la motilité cellulaire via des interactions avec des facteurs associés à l’actine. Dans les contextes hématopoïétique et immunitaire, une altération de la fonction de HAX-1 est associée à des défauts de survie et de différenciation des granulocytes, ce qui la rend pertinente pour l’étude de l’homéostasie des neutrophiles et des réponses inflammatoires. Ses rôles plus larges dans la signalisation de stress et la physiologie mitochondriale relient également HAX-1 à des mécanismes qui soutiennent le maintien des tissus et la dégénérescence en situation de stress cellulaire.
HAX-1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hax1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hax1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hax1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hax1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.