HAS2 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401032-LAC

Die humane Hyaluronan-Synthase 2 (HAS2) ist eine membranassoziierte Glykosyltransferase, die Hyaluronan polymerisiert – ein zentrales Glykosaminoglykan der extrazellulären Matrix, das die Gewebehydratation, die Organisation der perizellulären Matrix und die Zellmotilität reguliert. Durch die Steuerung von Ablagerung und Größenverteilung von Hyaluronan beeinflusst HAS2 Signalnetzwerke, die mit der Mechanotransduktion der ECM und Rezeptorwegen wie CD44 und RHAMM verknüpft sind, und prägt dadurch Adhäsion, Migration und Entzündungsantworten. Die HAS2-Aktivität ist eng mit der Aktivierung von Fibroblasten, der epithelial-mesenchymalen Transition und angiogenem Remodeling verbunden; ihre Fehlregulation ist häufig mit pathologischer Matrixakkumulation assoziiert. Eine veränderte, HAS2-getriebene Hyaluronan-Synthese wurde mit Fibrose, chronischen Entzündungszuständen und dem Umbau des Tumormikromilieus in Verbindung gebracht, was HAS2 zu einem nützlichen Knotenpunkt für die Untersuchung ECM-abhängiger Phänotypen macht.

HAS2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente HAS2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HAS2 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der HAS2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HAS2-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen HAS2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.