Plasmide Double Nickase (m) HARBI1: sc-433844-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) HARBI1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HARBI1 Double Nickase (m) et le plasmide HARBI1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Harbi1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) HARBI1 | sc-433844-NIC | 20 µg | $410.00 |
Harbi1 code pour HARBI1, une protéine domestiquée dérivée d’une transposase, impliquée dans la biologie du génome et la régulation de processus associés à l’ADN. Bien que ses fonctions moléculaires ne soient pas encore entièrement définies, HARBI1 a été associée à des voies liées à la réparation de l’ADN, à la dynamique de la chromatine et au maintien de la stabilité génomique, ce qui en fait une cible d’intérêt pour l’étude du contrôle du cycle cellulaire et des réponses au stress. Dans des modèles murins, la perturbation de facteurs impliqués dans la maintenance du génome peut influencer des phénotypes développementaux et la fitness cellulaire ; HARBI1 est donc étudiée dans des contextes où des altérations de la réponse aux dommages de l’ADN ou de la régulation de la chromatine contribuent à des mécanismes pertinents pour la maladie. Comprendre l’activité de HARBI1 soutient la recherche sur la manière dont des gènes dérivés de transposases sont réutilisés pour moduler la régulation génique chez les mammifères et l’intégrité du génome.
HARBI1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Harbi1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Harbi1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Harbi1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Harbi1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.