HADHA CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430176

개요

마우스 Hadha는 미토콘드리아 삼기능 단백질(mitochondrial trifunctional protein, HADHA)의 알파 서브유닛을 암호화하며, 이는 장쇄 지방산 β-산화에서 핵심적인 효소 복합체로서 enoyl‑CoA hydratase 및 3‑hydroxyacyl‑CoA dehydrogenase 활성을 촉매합니다. HADHA는 지질 분해를 acetyl‑CoA 생성 및 하위 TCA(시트르산) 회로의 플럭스와 연결함으로써 미토콘드리아 에너지 대사를 뒷받침하고, 산화환원 균형과 대사 적응에 광범위한 영향을 미칩니다. HADHA 기능의 장애는 미토콘드리아 지방산 이용 저하와 연관되며, 간, 심장, 골격근과 같은 산화성 조직에 영향을 미치는 선천성 대사 이상(inborn errors of metabolism)과 관련이 있습니다. 따라서 Hadha는 미토콘드리아 항상성, 영양 스트레스 반응, 지질 유래 신호전달이 교차하는 경로에서 널리 연구됩니다.

HADHA CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Hadha 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Hadha 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Hadha의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HADHA 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HADHA 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Hadha 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HADHA 기능에 중요한 Hadha 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Hadha 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HADHA CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 HADHA CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Hadha 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HADHA HDR 플라스미드 (m) 및 HADHA HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Hadha 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Hadha 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.