GULP Lentiviral Activation Particles (h): sc-406041-LAC

GULP1 kodiert das Adapterprotein GULP, einen Faktor mit Phosphotyrosin-Bindedomäne, der während der Efferozytose und Phagozytose Engulfment-Rezeptoren an der Zelloberfläche mit intrazellulären Signalwegen koppelt. GULP wirkt nachgeschaltet von Rezeptoren wie LRP1/MEGF10 und ist in Programme des Zytoskelett-Umbaus sowie des Membrantransports eingebunden, um die Beseitigung apoptotischer Zellen und zellulärer Trümmer zu fördern. Über diese Prozesse beeinflusst GULP den Entzündungszustand und die Gewebehomöostase, indem es mitbestimmt, wie myeloide und nicht-professionelle Phagozyten Zelltod auflösen. Eine Fehlregulation von Aufnahme- und Clearance-Wegen unter Beteiligung von GULP1 wurde u. a. im Kontext von Neuroinflammation, Neurodegeneration und Krebsbiologie untersucht, wo eine veränderte Trümmerbeseitigung die Signalgebung im Mikromilieu beeinflussen kann.

GULP Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente GULP1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

GULP Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der GULP1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen GULP-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen GULP1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.