G_{β 2} 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-402936-NIC

GNB2는 이종삼합체(heterotrimeric) G 단백질의 인간 Gβ2 소단위를 암호화하며, 활성화된 수용체를 하위 효과기(downstream effector)로 연결하는 GPCR 신호전달의 핵심 구성요소입니다. Gβ2는 Gγ 소단위와 필수적인 이합체를 형성하고 Gα와 조립됨으로써 cAMP/PKA, PLCβ–IP3/DAG–Ca²⁺ 신호전달, 이온 채널 조절 등 2차 전달자 경로에 영향을 주며, 그 결과 화학주성, 분비, 신경 흥분성과 같은 세포 반응을 형성합니다. G 단백질 소단위의 균형이 교란되면 증식, 분화, 면역세포 이동을 조절하는 신호 네트워크가 재편될 수 있습니다. 따라서 GNB2와 연관된 GPCR 회로의 변화는 인간 질환 생물학에서 신호 이상 상태와 경로 의존성을 이해하는 맥락에서 자주 연구됩니다.

Gβ 2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 GNB2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 GNB2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 GNB2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, GNB2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.