Plasmide Double Nickase (h) Gβ 2: sc-402936-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gβ 2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gβ 2 Double Nickase (h) et le plasmide Gβ 2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GNB2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gβ 2 | sc-402936-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gβ 2 | sc-402936-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNB2 code la sous-unité humaine Gβ2 des protéines G hétérotrimériques, un composant central de la transduction du signal des RCPG (récepteurs couplés aux protéines G) qui couple les récepteurs activés aux effecteurs en aval. En formant des dimères obligatoires avec des sous-unités Gγ et en s’assemblant avec Gα, Gβ2 influence des voies de seconds messagers incluant la signalisation AMPc/PKA, PLCβ–IP3/DAG–Ca²⁺, ainsi que la régulation des canaux ioniques, modulant des réponses cellulaires telles que la chimiotaxie, la sécrétion et l’excitabilité neuronale. Une perturbation de l’équilibre des sous-unités des protéines G peut reconfigurer des réseaux de signalisation qui gouvernent la prolifération, la différenciation et le trafic des cellules immunitaires. Ainsi, les circuits RCPG associés à GNB2 sont fréquemment étudiés dans le contexte d’états de signalisation dérégulés et de dépendances de voies dans la biologie des maladies humaines.
Gβ 2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GNB2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GNB2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GNB2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GNB2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.