GSTT1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420721

Übersicht

Das Mausgen **Gstt1** kodiert die Glutathion-S-Transferase Theta 1 (GSTT1), ein Phase‑II‑Detoxifikationsenzym, das die Konjugation von Glutathion an eine Reihe elektrophiler Xenobiotika und reaktiver endogener Metabolite katalysiert. GSTT1 trägt zur Redoxhomöostase und zur zellulären Abwehr gegen oxidativen Stress bei, indem es die Entfernung von Produkten der Lipidperoxidation und anderen reaktiven Zwischenprodukten erleichtert. Seine Aktivität steht in Wechselwirkung mit dem Glutathionstoffwechsel, Signalwegen der chemischen Karzinogenese‑Antwort sowie umfassenderen Netzwerken der Elektrophil-/ROS‑Signalgebung, die die zelluläre Stressadaptation beeinflussen. Variationen in der Funktion der GSTT‑Familie werden häufig im Zusammenhang mit Toxikantensensitivität, entzündungsassoziierten Gewebeschäden und Tumorbiologie‑Modellen untersucht, in denen die Detoxifikationskapazität Phänotypen modifizieren kann.

Das GSTT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Gstt1-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Gstt1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Gstt1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GSTT1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Gstt1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GSTT1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Gstt1-Exone abzielen, die für die GSTT1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Gstt1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GSTT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom GSTT1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Gstt1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GSTT1 HDR-Plasmid (m) und GSTT1 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Gstt1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Gstt1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.