GSTT1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420721

Descripción general

El gen murino **Gstt1** codifica la glutatión S-transferasa theta 1 (GSTT1), una enzima de desintoxicación de fase II que cataliza la conjugación con glutatión de una variedad de xenobióticos electrofílicos y metabolitos endógenos reactivos. GSTT1 contribuye a la homeostasis redox y a la defensa celular frente al estrés oxidativo al facilitar la eliminación de productos de peroxidación lipídica y otros intermediarios reactivos. Su actividad se cruza con el metabolismo del glutatión, las vías de respuesta relacionadas con la carcinogénesis química y redes más amplias de señalización por electrófilos/ROS que influyen en la adaptación celular al estrés. La variación en la función de la familia GSTT se estudia con frecuencia en el contexto de la sensibilidad a tóxicos, el daño tisular asociado a la inflamación y modelos de biología tumoral, donde la capacidad de desintoxicación puede modificar los fenotipos.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GSTT1 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gstt1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gstt1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gstt1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GSTT1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gstt1 para la investigación de la señalización de GSTT1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gstt1 críticos para la función de GSTT1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gstt1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GSTT1 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GSTT1 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gstt1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GSTT1 (m) y el plásmido HDR GSTT1 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gstt1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gstt1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.