Plásmido Doble Nickase (h) GSTO1: sc-404107-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GSTO1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GSTO1 (h) y el plásmido de doble nickasa GSTO1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GSTO1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GSTO1 Anticuerpo (21): sc-130317
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GSTO1 | sc-404107-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GSTO1 | sc-404107-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutatión S-transferasa omega 1 (GSTO1) es una enzima citosólica de la clase omega de las GST que utiliza glutatión para catalizar reacciones de tioltransferasa y de desglutatiónilación, influyendo en el equilibrio redox celular y en el estado de S-glutatiónilación de las proteínas. A través de estas actividades, GSTO1 contribuye a la desintoxicación y a la regulación de las respuestas al estrés oxidativo, conectando con el metabolismo del glutatión y con vías de señalización más amplias controladas por el estado redox. Las variaciones en la expresión o la actividad de GSTO1 se han asociado con una susceptibilidad modificada al daño oxidativo y a la señalización inflamatoria, procesos relevantes en la neurodegeneración, la biología del cáncer y contextos de estrés metabólico. En células humanas, la función de GSTO1 suele estudiarse en relación con el manejo de electrófilos reactivos, la regulación redox-dependiente de enzimas y los programas transcripcionales adaptativos al estrés.
GSTO1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GSTO1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GSTO1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GSTO1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GSTO1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.