GSK3 beta Lentiviral Activation Particles (m): sc-425249-LAC

Das murine Gen **Gsk3b** kodiert die Glykogensynthasekinase 3 Beta (GSK3 Beta), eine konstitutiv aktive Serin/Threonin-Kinase, die Signale aus den PI3K–AKT-, Wnt/β-Catenin- und mTOR-Signalwegen integriert, um phosphorylierungsabhängigen Proteinumsatz und Transkriptionsprogramme zu regulieren. GSK3 Beta steuert den Glykogenstoffwechsel, das Fortschreiten des Zellzyklus, Apoptose und die Zytoskelettdynamik und moduliert die neuronale Plastizität über Effekte auf mikrotubuliassoziierte Proteine und die synaptische Signalübertragung. In der kanonischen Wnt-Signalübertragung ist GSK3 Beta Bestandteil des Destruktionskomplexes, der β-Catenin phosphoryliert und so Ligandeninput mit Änderungen der Genexpression koppelt. Eine fehlregulierte Gsk3b-Aktivität ist an Mechanismen beteiligt, die für Stoffwechselstörungen, Entzündungen, krebsassoziierte Signalgebung und Neurodegeneration relevant sind, was Gsk3b zu einem häufigen Ziel für die Analyse von Signalwegen in Mausmodellen macht.

GSK3 beta Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Gsk3b-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

GSK3 beta Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Gsk3b-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen GSK3 beta-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Gsk3b-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.