Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 1 (h): sc-406525
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GRK 1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GRK 1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GRK 1 Antibody (D11): sc-56910
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 1 (h) | sc-406525 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
GRK1 code la kinase 1 des récepteurs couplés aux protéines G (kinase de la rhodopsine), une sérine/thréonine kinase qui phosphoryle la rhodopsine activée par la lumière afin de favoriser la liaison de l’arrestine et l’arrêt rapide de la phototransduction dans les photorécepteurs à bâtonnets. Cette activité est au cœur de la désensibilisation des RCPG et de l’adaptation du signal dans la rétine, en coordonnant la cinétique de récupération et en limitant une signalisation prolongée en aval. Une altération de la fonction de GRK1 est associée à des affections rétiniennes héréditaires, notamment la cécité nocturne congénitale stationnaire, reflétant une désactivation déficiente de la signalisation des bâtonnets. GRK1 est donc largement étudiée dans les voies impliquées dans la régulation des RCPG, les réponses au stress liées au cycle visuel et l’homéostasie des photorécepteurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GRK 1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GRK1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GRK1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GRK1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GRK 1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GRK1 pour l'étude de la signalisation de GRK 1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GRK1 essentiels à la fonction de GRK 1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GRK1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GRK 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le GRK 1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GRK1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GRK 1 plasmide HDR (h) et le GRK 1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GRK1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GRK1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.