Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRHL3 (h): sc-404946
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GRHL3 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GRHL3, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GRHL3 Antibody (C-12): sc-398838
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GRHL3 (h) | sc-404946 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
GRHL3 (grainyhead-like transcription factor 3) est un régulateur transcriptionnel spécifique de séquence qui coordonne la différenciation épithéliale, la formation de la barrière et les programmes géniques induits par les lésions. Il contribue au maintien de l’homéostasie épidermique en modulant la prolifération des kératinocytes et les réseaux de différenciation terminale, et s’inscrit à l’interface de voies contrôlant la polarité cellulaire, l’adhésion et le contrôle transcriptionnel de gènes structuraux et de jonction. Une activité dérégulée de GRHL3 a été associée à des défauts du développement et à des pathologies épithéliales, et des profils d’expression altérés sont rapportés dans des études portant sur les épithéliums malpighiens et des états transcriptionnels associés aux carcinomes. En tant que facteur nucléaire façonnant l’expression génique épithéliale, GRHL3 est fréquemment étudié dans des modèles de morphogenèse tissulaire, de réponses au stress et d’engagement de lignée.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GRHL3 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GRHL3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GRHL3, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GRHL3 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GRHL3.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GRHL3 pour l'étude de la signalisation de GRHL3, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GRHL3 essentiels à la fonction de GRHL3
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GRHL3 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GRHL3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le GRHL3 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GRHL3. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GRHL3 plasmide HDR (h) et le GRHL3 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GRHL3 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GRHL3 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.