Plasmide Double Nickase (h) GRB14: sc-405224-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GRB14 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GRB14 Double Nickase (h) et le plasmide GRB14 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRB14. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GRB14 | sc-405224-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GRB14 | sc-405224-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GRB14 (growth factor receptor–bound protein 14) est une protéine adaptatrice qui se lie aux récepteurs à activité tyrosine kinase activés, jouant un rôle majeur dans la modulation de la signalisation du récepteur de l’insuline et d’IGF1R. En interagissant avec les sites de phosphorylation des récepteurs et avec des effecteurs en aval, GRB14 influence la sortie des voies PI3K–AKT et MAPK, façonnant le métabolisme cellulaire, la prolifération et la régulation par rétrocontrôle. Une activité altérée de GRB14 a été associée à une dérégulation de la signalisation de l’insuline et à des phénotypes métaboliques, et son contexte de signalisation est également pertinent pour des états cellulaires induits par des facteurs de croissance étudiés en biologie du cancer. En tant que régulateur de type échafaudage, GRB14 constitue un nœud exploitable pour disséquer les mécanismes de réglage des voies et d’atténuation du signal dans les cellules humaines.
GRB14 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRB14 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRB14. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRB14. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRB14.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.