GPR158 Plasmide Double Nickase (m): sc-433824-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GPR158 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GPR158 Double Nickase Plasmid (m) e il GPR158 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Gpr158. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GPR158 Plasmide Double Nickase (m) | sc-433824-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GPR158 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-433824-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino **Gpr158** codifica **GPR158**, un recettore accoppiato a proteine G di classe C orfano, arricchito nel sistema nervoso, che funge da piattaforma di segnalazione integrando segnali extracellulari con vie effettrici intracellulari. GPR158 è stato associato alla modulazione della segnalazione dell’AMPc e di processi legati a MAPK/ERK, influenzando l’eccitabilità neuronale, l’organizzazione sinaptica e la plasticità dipendente dall’esperienza. Attraverso interazioni con proteine regolatorie e componenti sinaptici, contribuisce ad adattamenti a livello di circuito rilevanti per la responsività allo stress e per i comportamenti cognitivi. La disregolazione della segnalazione associata a GPR158 è stata studiata nel contesto di fenotipi neuropsichiatrici e neurosviluppo, a supporto del suo impiego nella ricerca di neuroscienze meccanicistiche e di genomica funzionale.
GPR158 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Gpr158 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Gpr158. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Gpr158. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Gpr158 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.